核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。导致这次疫情的新冠病毒是一种含有RNA的病毒。1月初,我国科学家在极短时间内完成对新冠病毒全基因组序列的解析,并通过与其它物种的基因组序列对比,发现了新冠病毒中的特异核酸序列。因此,如果能在患者样本中检测到新冠病毒的特异核酸序列,就可以判断该患者可能被感染。
在检测新冠病毒特异序列的方法中,最常见的是荧光定量PCR(聚合酶链式反应)法。因PCR反应模板仅为DNA,因此在进行PCR反应前,应将新型冠状病毒核酸(RNA)逆转录为DNA。这个检测的原理是以病毒独特的基因序列为检测靶标,通过PCR扩增,使选择的这段靶标DNA序列指数级增加。每一个扩增出来的DNA序列,都可与预先加入的一段荧光标记探针结合,产生荧光信号。扩增出来的靶基因越多,累计的荧光信号就越强。这样就可以通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。
据冯录召介绍,核酸检测过程包括标本处理、核酸提取、进行PCR检测等多个步骤,平均检测时间需要2-3个小时。由于它是直接对采集标本中的病毒核酸进行检测,特异性强、敏感度相对较高,因此是当前主要的检测手段。
而抗体检测,则是对人体血液中的抗体水平进行检测,包括胶体金法和磁微粒化学发光法,其中胶体金法平均检测时间为15分钟左右,磁微粒化学发光法一般需要30-60分钟。
“但是,由于在病毒感染早期,人体内可能还没有产生抗体,这就存在检测的窗口期。”冯录召说,抗体检测可用于对核酸检测阴性的病例进行辅助诊断,也可以对病例进行排查筛查,但是还不能代替核酸检测方法。
核酸检测中常用的聚合酶链式反应(PCR),是由美国生物化学家凯利·巴克斯·穆利斯于1985年发现的。PCR技术一经问世,就被迅速而广泛地用于分子生物学的各个领域。如今,PCR技术已成为生物化学和分子生物学的关键技术。
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